Efectos de la temperatura, la actividad de agua y el tiempo de incubación en el crecimiento fúngico y la producción de aflatoxina B1 por aislados toxicogénicos de Aspergillus flavus en sorgo / Effects of temperature, water activity and incubation time on fungal growth and aflatoxin B1 production by toxinogenic Aspergillus flavus isolates on sorghum seeds

Sorghum, which is consumed in Tunisia as human food, suffers from severe colonization by several toxigenic fungi and contamination by mycotoxins. The Tunisian climate is characterized by high temperature and humidity that stimulates mold proliferation and mycotoxin accumulation in foodstuffs. This study investigated the effects of temperature (15, 25 and 37 °C), water activity (a w, between 0.85 and 0.99) and incubation time (7, 14, 21 and 28 d) on fungal growth and aflatoxin B1 (AFB1) production by three Aspergillus flavus isolates (8, 10 and 14) inoculated on sorghum grains. The Baranyi model was applied to identify the limits of growth and mycotoxin production. Maximum diameter growth rates were observed at 0.99 a w at 37 °C for two of the isolates. The minimum a w needed for mycelial growth was 0.91 at 25 and 37 °C. At 15 °C, only isolate 8 grew at 0.99 a w. Aflatoxin B1 accumulation could be avoided by storing sorghum at low water activity levels (≤0.91 a w). Aflatoxin production was not observed at 15 °C. This is the first work on the effects of water activity and temperature on A. flavus growth and AFB1 production by A. flavus isolates on sorghum grains.

El sorgo, que se consume en Túnez como alimento humano, puede sufrir la colonización severa de varios hongos toxicogénicos, con la consiguiente bioacumulación de micotoxinas. Además, el clima de Túnez, caracterizado por las altas temperaturas y humedad, estimula el crecimiento fúngico y la acumulación de micotoxinas en los productos alimenticios. Este estudio investigó los efectos de la temperatura (15, 25 y 37 °C), la actividad de agua (a w) (entre 0,85 y 0,99) y el tiempo de incubación (7, 14, 21 y 28 días) sobre el crecimiento y la producción de aflatoxina B1 (AFB1) de 3 aislados de Aspergillus flavus (designados como 8, 10 y 14) que se inocularon sobre granos de sorgo. El modelo Baranyi se aplicó para identificar los límites del crecimiento y la producción de micotoxinas. Las tasas máximas de crecimiento para 2 de los aislados se observaron en la combinación 0,99 a w y 37 °C. La a w mínima necesaria para el crecimiento del micelio fue de 0,91 a 25 °C y 37 °C. A 15 °C, solo el aislado 8 creció a 0,99 a w, pero fue incapaz de producir la aflatoxina B1. Es posible evitar la acumulación de aflatoxina B1 en el sorgo almacenándolo a baja actividad de agua (≤ 0,91 a w). Este es el primer trabajo que ha estudiado el efecto de la actividad del agua y la temperatura sobre el crecimiento de aislados de A. flavus y su producción de aflatoxina B1 en granos de sorgo.

Estudo sobre a ocorrência de fungos e aflatoxina B1 na dieta de bovinos leiteiros em São Paulo / Study on the occurrence of fungi and aflatoxina B1 in the diet of dairy cattle in São Paulo, Brazil

A qualidade da dieta ofertada às vacas em lactação é uma preocupação dos agentes de saúde devido à possibilidade da detecção de micotoxinas prejudiciais a saúde humana e animal. Os objetivos do trabalho foram avaliar o perfil da micobiota, determinar a atividade de água (Aa) e a ocorrência natural de aflatoxina B1 (AFB1) em dietas ofertadas a vacas em lactação de fazendas leiteiras no estado de São Paulo, Brasil. As amostragens das dietas foram realizadas diretamente dos cochos de lote de 15 vacas, em dois dias consecutivos com intervalos de 24h e a cada 15 dias, perfazendo um período de 45 dias de amostragens por fazenda. A purificação e determinação de AFB1 foram realizadas em colunas de imunoafinidade e Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). O estudo da micobiota presente nas amostras das dietas (288) revelou que as leveduras foram predominantes em todas as dietas (83,97 a 99,98%). Foram isolados 15 gêneros de fungos filamentosos, com os gêneros Aspergillus spp (20,09%), Fusarium spp (14,16%) e Penicillium spp (11,48%) os mais prevalentes. As contagens de Unidades Formadoras de Colônias por grama de alimento (UFC. g-1) variaram de 102 a 1011. A atividade de água das amostras variou entre 0,91 a 0,98. Foi detectada a presença de AFB1 em 31,44% das amostras com teores entre 1,68 a 194,51μg.kg-1. Medidas de boas práticas de produção, estocagem e utilização devem ser tomadas para diminuir a ocorrência de AFB1 nas dietas ofertadas às vacas em lactação...

The quality of the diet offered to lactating cows is a concern to health officials the possibility of detecting mycotoxins harmful to human and animal health. The objectives were to evaluate the profile of mycoflora, determine the water activity (Aw) and the natural occurrence of aflatoxin B1 (AFB1) in diets offered to lactating cows from dairy farms in the state of São Paulo, Brazil. Samples of the diets were taken directly from the troughs batch of 15 cows, on two consecutive days at intervals of 24 hours and every 15 days with a period of 45 sampling days per farm. Purification and determination of AFB1 were performed on immunoaffinity columns and High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The study of mycobiota present in samples of diets (288) revealed that yeast cells were predominant in all diets (83.97 to 99.98%). 15 genera were isolated from filamentous fungi, with Aspergillus spp (20.09%), Fusarium spp. (14.16%) and Penicillium spp. (11.48%) the most prevalent. The counts of colony forming units per gram of food (UFC.g-1) ranged from 102 a1011. The water activity of the samples ranged from 0.91 to 0.98. We have detected the presence of AFB1 in 31.44% of samples with levels between 1.68 a 194.51μg.kg-1. Measures of good production, storage and use should be taken to reduce the occurrence of aflatoxin B1 in the diet offered to lactating cow...

Mechanism of removal of aflatoxin B1 by a resistant bacterium.

A bacterium resistant to aflatoxin B1 isolated from the soil was shown to remove a maximum 26% of toxin at 3 microg ml(-1). A comparison of spectrophotometric and radioisotope methods showed that a maximum of 48 hr was sufficient to remove the toxin. Radioisotope analysis showed that the radioactivity decreased in the chloroform phase while it increased in the aqueous phase during the time course of the experiment. An analysis of the supernatant of culture medium showed that the bacterium had converted aflatoxin B1 to water soluble compounds with lambda(max) of 338 and 374.

Determinación de aflatoxina M1 en leche / Detection of aflatoxin M1 in milk samples

La presencia de micotoxinas en productos lácteos se debe, por lo general, a la ingesta por parte del ganado lechero de alimentos contaminados con aflatoxina B1 (AFB1). La AFM1 es el principal metabolito hepático 4-hidroxilado de la AFB1 que se excreta por la leche. Es tan tóxica como la AFB1, aunque algunos autores han demostrado que no es tan mutagénica. Recientemente se han clasificado a las AFB1 y AFM1 como carcinógenos humanos de la clase 1 y 2B respectivamente y también se ha observado que la AFM1 tiene una alta actividad genotóxica. El objetivo de este trabajo es determinar por TLC (cromatografía en capa delgada) la presencia de AFM1 en 50 muestras de leche, recolectadas en los meses de otoño, tanto de origen comercial como provenientes de pequeños tambos, donde se ordeñan artesanalmente, para estimar los niveles de exposición a la AFM1 en la población. No se detectó la presencia de AFM1 en ninguna de las muestras estudiadas hasta este momento. Esto muestra que en esta época del año, donde las vacas lecheras se alimentan de pasto natural, no existe contaminación. Seguiremos estudiando muestras recolectadas en los meses de invierno para controlar que sucede cuando además reciben suplemento alimentario. La leche es el alimento básico consumido sobre todo por niños en etapa de crecimiento; por lo tanto, debe ser monitoreada de contaminantes, incluyendo AFM1, más aún en países como el nuestro donde los factores climáticos pueden favorecer la incidencia de la misma. En nuestro país hay muy escasos datos de incidencia de AFM1 en la leche fluida, leche en polvo y en otros derivados lácteos. La dificultad para realizar estudios toxicológicos en humanos con la ingesta de AFM1 y la dificultad para la detoxificación de micotoxinas de las dietas hacen de los programas de monitoreo la principal estrategia para disminuir el riesgo de exposición a estas micotoxinas, por eso creemos que más estudios deberían efectuarse para intensificar los conocimientos acerca de toda nuestra producción lechera

Survey of aflatoxins B1, M1 and aflatoxicol in poultry and swine tissues from farms located in the states of Rio Grande do Sul and Santa Catarina, Brazil

Oitenta e três amostras de fígados e rins de aves e suínos foram analisadas para determinaçäo de resíduos de aflatoxinas B1, M1 e aflatoxicol, por cromatografia em uma única amostra de figado de suíno proveniente do Rio Grande do Sul (Brasil), na concentraçäo de 27ng/g (ppb) enquanto nenhuma amostra de fígado e rim de aves apresentou aflatoxinas e aflatoxicol, porém traços de aflatoxina M1 foram encontrados em uma amostra de fígado. Recuperaçöes das aflatoxinas B1, M1 e aflatoxicol dos tecidos artificialmente contaminados foram: 74 p/cento a 95,2 p/cento para aflatoxina B1; 60 p/cento 80 p/cento para aflotoxina M1 e de 80 p/cento a 95 p/cento para aflatoxicol

Standartization of a method for the inoculation of peanuts (Arachis hypogael L) - Tatu vermelho variety with Aspergillus flavus NRRL 6513, an Aflatoxin B1 producer

Foram determinadas as condiçöes analíticas ideais para a inoculaçäo de uma cepa de Aspergillus flavus NRRL 6513, fortemente produtora de aflatoxina B1 em amendoim, variedade Tatu Vermelho. A maior produçäo de aflatoxina foi verificada após a adiçäo, em 1,0g de amendoim moído e autoclavado (121oC/20 min.), de 0,5 ml de suspensäo salina de esporos (4x10.6) esporos/ml) de Aspergillus flavus NRRL 6513, de 10 dias de idade, seguido de incubaçäo por 7 dias